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          去氧膽酸鹽瓊脂(DC)使用原理及方法

          楊永帥
          錄入時間:2019-6-6 15:16:10 來源:青島海博生物

          一、實驗原理:

          用于大腸菌群的固體平板檢測,其中蛋白胨提供氮源;乳糖提供碳源;去氧膽酸鈉是一種抑菌劑,主要抑制革蘭氏陽性菌的生長;磷酸氫二鉀是一種緩沖體系;檸檬酸鐵和檸檬酸鈉是一種生長促進劑;中性紅是一種指示劑,在酸性時呈紅色,當大腸菌群發酵乳酸時產生酸性物質,所以菌落呈紅色;氯化鈉是維持細菌生長時的滲透壓;瓊脂是一種凝固劑。

          二、試驗方法:

          稱取本品43.0g,加入1000ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸1分鐘。冷卻至45-50℃左右時,傾入無菌平皿,無需高壓滅菌。使用前,把制備好的平板放置室溫10-20分鐘。

          1、制備質控菌液。

          2、選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,均勻涂布于平板上,每一稀釋度接種兩個平板。

          3、用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多余液體,在平板表面劃六條平行直線,同時接種兩個平板。

          4、35℃倒置培養基培養24小時,記錄實驗結果。

          三、結果判定:

          質控菌株

          菌株編號

          接種量(CFU)

          生長情況

          回收率

          其他特征

          金黃色葡萄球菌

          ATCC25923

          /

          G≤1

          /

          /

          大腸埃希氏菌

          ATCC25922

          20-200

          +++

          ≥70%

          紅色菌落

          傷寒沙門氏菌

          ATCC14028

          20-200

          +++

          ≥70%

          無色透明菌落

          弗氏檸檬酸鹽桿菌

          ATCC43864

          20-200

          +++

          ≥70%

          紅色菌落

          陰溝腸桿菌

          ATCC23355

          20-200

          +++

          ≥70%

          紅色菌落


                

          圖1-2 去氧膽酸鹽瓊脂微生物質控結果

          備注:a:金黃色葡萄球菌,b:大腸埃希氏菌,c:傷寒沙門氏菌,d:弗氏檸檬酸鹽桿菌,e:陰溝腸桿菌

           

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